中药生精汤提高雄性娃娃鱼成熟率及精子活力的研究

　　提要：本文报道用中药生精汤培育雄性娃娃鱼亲体；提高了成熟率和精子活力。
　　关键词：中药、娃娃鱼、生精汤、成熟率、精子活力。
　　娃娃鱼人工繁殖虽已获得了初步成功，但至今未能取得突破性进展，未能实现娃娃鱼大规模化繁殖，影响了产业化进程。其资源也难以得到保护、增殖。是人工繁殖技术因素，还是娃娃鱼性腺发育机制等因素制约了其发展？我们通过十几年的研究，找出了两种因素制约了娃娃鱼规模化繁殖：一是娃娃鱼亲体（雄性）精子活力低；二是雌、雄性腺发育不同步。针对这些发育生物学问题，我们依据生殖生理学基础知识，运用中医学、中药药理学、中医男科学、中医内分泌学、神经学、分子生物学、精子动力学等相关学科原理，研制了中药生精汤。进行了生精汤的药理、药效实验研究和临床实验。结果表明：中药生精汤提高了雄性娃娃鱼成熟率为52%，精子活力也提高了11.6%。
一、 材料和方法
　　1、 中药生精汤组方原理：由补肾填精、益气健脾、活血化瘀类中药组成。
　　2、 实验娃娃鱼：雄性20尾、体重（尾）1.3公斤。
　　3、实验方法：中药组10尾娃娃鱼、对照组10尾娃娃鱼。实验采用口服，即每50公斤饲料中添加生精汤1-2.5公斤拌料投喂。
　　4、精子活力检查方法
　　精子活力：根据质量、数量和时间3个参数进行检查。
　　1）、质量是指精子前向运动，参照Lanasa（1985）将精子活力为分5级。
　　Ⅴ级：精子快速直线前向运动；
　　Ⅳ级：精子快速前向运动；
　　Ⅲ级：精子速度下降，随机方向；
　　Ⅱ级：精子无前向运动；
　　Ⅰ级：清子不活动。
　　2）、数量是指活动精子的百分率，镜检100个活动精子的百分率。
　　5、精子存活率（活精子和死精子的染色法）检查方法
　　1）、一滴精液与一滴0.5%蓝曙红液（用蒸馏水配置）混合；
　　2）、加入2滴10%苯胺黑（nigzosin）（蒸馏水配置）混匀；
　　3）、将精液涂片空气干燥。400倍显微镜下观察；
　　4）、活精子不着色，死精子染上红色，数100个精子，测出活精子百分率。
　　6、中药生精汤制备：采用中药制剂工艺水提醇沉法制备而成粉剂。经检测，每克生精汤含雄性激素类似物7.5毫克。
　　7、实验时间：1997～1999年4-8月份。每年4-8月份是娃娃鱼性腺发育周期。
二、 结果
　　在娃娃鱼性腺发育周期内进行生精汤实验，结果见表一。 

　　生精汤组成熟率为80%，对照组为28%；其成熟率生精汤组对照组提高了52%。生精汤组精子存活率为62.9%，对照组为35.3%；其存活率生精汤组比对照组提高了27.6%。生精汤组精子活力为30.6%，对照组为19.8%；其活力生精汤组比对照组提高了10.8%。
三、讨论
　　（一）中医药对提高精子活力的基础理论的探索
　　中医辨证思维是治疗疾病的基本方法，而阴阳学说则是治疗疾病的基础理论。中医认为肾藏精、主生殖，肾有肾阴和肾阳，它是雄性生长发育和生殖的基本物质和功能。依据精气属火为阳，精液属水为阴的阴阳学说，将精液视为阴中之阴，精子则为阴中之阳。精子本身又可分为阴阳，即精体为阴—阳中之阴；精子存活率及活力为阳—阳中之阳。又根据阳化气，阴成形的学说；精子数量的多少，多责于肾阳的亏损；精子活力的强弱，取决于肾阳的盛衰。通过以上分析，临床上治疗精子数量少，主要以滋肾阴为主，治疗精子存活率低，精子活力差（低）则以补肾壮阳为主补，又因阴阳之间互相依存，互相制约，互相化生；往往阴损及阳、阳损及阴，临床上则出现阴阳两虚的表现，即精子数量少合并精子存活率低，精子活力差（低），治疗则应阴阳双补。
　　（二）现代医学研究精子活力低下的病因和发病机理
　　精子的运动能力是正常成熟精子的一个重要的生理功能，这种功能保证了生殖过程中的受精能力，并且参与精子对卵子的穿透作用。
　　影响精子活力的病因
　　1、免疫因素
　　自身免疫可通过两种途径造成精子活力差。
　　⑴自身免疫影响精子的发生，使生精细胞脱落。
　　⑵性器官的自身免疫过程缺陷可造成精子输出的阻断。
　　2、内分泌疾病
　　生殖过程需要多种激素参与才能完成，下丘脑—垂体—性腺轴是维持正常生殖功能的主要调节机制。FSH、LH等的任何病理性变化均会导致精子活力低下。
　　3、染色体异常
　　精子染色体的变化（染色体的分裂分为4个阶段），精子DNA完整性可用Y啶橙染色来观察发现正常精子和活力低下的精子在完成的分裂及再聚合时存在明显的差异。染色体异常反映精子活力低下可能是由于精子结构异常所致。
　　（三）中药生精散对提高精子活力的研究
　　辨证论治是中医治疗疾病的基本原则，亦是男性不育症的治疗准则。
　　肾藏精有阴阳之分。肾之阴阳，既要充盛，也要相对平衡协调，才能维持正常的生殖作用。肾阳亏损是导致精子存活率低和精子活力差的根本因素。治疗时则以补肾壮阳为主。
　　根据中医阴阳学说和辨证论治的原则。针对雄性娃娃鱼精子活力（差）的病因是导致其繁殖率低的关键因素。我们运用传统中医基础理论、中药药理、中医男科学结合现代生殖生理学、神经生物学、发育生物学的知识研制了生精散，经过药理和药效学的研究证实了生精散能显著提高娃娃鱼雄性精子活力。生精散药效学研究表明：能促进和维持大鼠精囊和睾丸的生长发育，提高睾丸的生精力，使精原细胞数量增加，活性增强。
　　生精散药理学研究表明：能使大鼠性腺重量增加，垂体重量增加，使小鼠血浆睾丸酮水平上升。实验还提示，生精散具有雄性激素样作用。


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